BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES

 Generalidades 

Al grupo de bacilos gram negativos no fermentadores pertenecen bacterias taxonómicamente muy diversas, pero esta agrupación es útil para la clasificación en el diagnostico clínico. Muchas de estas especies son incapaces de acidificar medios como el TSI y crecen considerablemente mejor en condiciones aerobias que en condiciones anaeróbicas. Incluso se encuentran algunas cepas que son incapaces de crecer anaeróbicamente. 

Este grupo de bacterias se consideran como patógenos oportunistas, especialmente de infecciones intrahospitalarias, donde los principales factores de riesgo para los pacientes son tratamientos con antimicrobianos y/o cirugía, instrumentación y permanencia del paciente en salas de cuidados intensivos por períodos prolongados. Adicionalmente, es importante considerar la resistencia natural a los antibióticos que muchas de estas bacterias presentan y la facilidad con la que adquieren resistencia a otros antibióticos. 

A las pruebas de escrutinio que se utilizan para su identificación como morfología microscópica, oxidasa, movilidad, producción de indol y acidificación de carbohidratos, se le han agregado pruebas como el crecimiento a temperatura ambiente y crecimiento en medios selectivos como el agar MacConkey. Algunas cepas solamente crecen a temperatura ambiente y son incapaces de crecer en agar MacConkey. 

En este grupo se encuentran géneros como Acinetobacter, Moraxella, Eikenella, Flavobacterium, Alcaligenes (Achromobacter), Actinobacillus, Capnocytophaga, Cardiobacterium, Stenotrophomonas y Kingella, entre otras de menor importancia médica. Pseudomonas aeruginosa es la especie más frecuentemente aislada del grupo de bacilos Gram-negativos no fermentadores, seguida de Acinetobacter spp. y Stenotrophomonas maltophilia.

 Estos dos últimos agentes se caracterizan por producir infecciones intrahospitalarias y en su gran mayoría se asocian al uso de respiradores o al implante de catéteres. Como una característica importante, estos dos agentes presentan una elevada resistencia natural a los antibióticos y son capaces de adquirir resistencia contra otros antibióticos con facilidad. Por lo anterior, estos agentes son importantes en el ambiente hospitalario y son cada vez más frecuentes los aislamientos de estas bacterias produciendo infecciones severas. 

La especie Stenotrophomonas maltophilia ha sufrido una serie de cambios taxonómicos. Inicialmente, fue clasificada como Pseudomonas maltophilia, luego se reclasificó en el género Xanthomonas y hasta años recientes que se le asignó a un nuevo género denominado Stenotrophomonas. 

Esta bacteria es un bacilo no fermentador, que produce colonias en agar sangre de tono amarillento, crema claro o verde lavanda, opacas y con un fuerte olor amoniacal. Si se crece en agar nutritivo, sus colonias presentan una coloración amarillenta, con un pigmento soluble en agua pero que no difunde al agar. Esta especie es móvil, utiliza la maltosa, es oxidasa negativo y ONPG positiva. S. maltophilia se asocia como agente de neumonías primarias e infecciones nosocomiales como septicemias, infecciones urinarias, bronconeumonías por aspiración, infecciones de heridas, mastoiditis y ectima gangrenoso. Es importante en infecciones de pacientes con cáncer.

Las especies de Acinetobacter se caracterizan por ser bacilos pequeños o bien cocobacilos, son no móviles, oxidasa negativa y pueden tener una morfología en pares (diplococo). Sus colonias en agar sangre no son característicos (producen colonias planas, opacas y pequeñas), crecen bien en agar MacConkey, pero con colonias de pequeño tamaño, incoloras o bien escasamente pigmentadas de rosado. 

En infecciones vaginales, es importante descartar la presencia de Acinetobacter spp. ya que puede presentar una morfología semejante Neisseria gonorrhoeae. La diferenciación se puede hacer mediante la prueba de crecimiento en agar MacConkey y la prueba de citocromo C oxidasa. A diferencia de Acinetobacter spp, Neisseria gonorrhoeae no crece en MacConkey y es oxidasa positivo. Las especies de Acinetobacter están ampliamente distribuidas en la naturaleza tanto en ambientes húmedos como en superficies secas y pueden ser parte de la flora normal de la piel y mucosas de los seres humanos. 

Las especies mas frecuentes aisladas son A.baumannii, A. iwoffi, A. haemolyticus, y A. johnsonii. Otros bacilos gram negativos no fermentadores tienen bajos porcentajes de aislamiento en muestras clínicas, por lo que su importancia es mucho menor. Sin embargo tienen características epidemiológicas y reacciones bioquímicas semejantes a los dos agentes indicados anteriormente. 

Todos los bacilos Gram negativos no fermentadores presentan una amplia resistencia a los antimicrobianos, son organismos que causan infecciones intrahospitalarias y tienen su origen en ambientes acuáticos. Las especies de Moraxella son cocobacilos oxidasa positiva, no móviles y se presentan como asacarolítico porque es inerte a los carbohidratos. Estas especies pueden encontrarse como flora normal de piel y mucosas. Se ha demostrado que por lo menos Moraxella osloensis, M. liquefaciens y M. lincolnii son flora normal de vías respiratorias humanas, aunque rara vez se encuentran produciendo bacteremia, endocarditis, conjuntivitis y meningitis.

 Moraxella catarralis es frecuente en infecciones óticas en niños. Oligella spp. son un grupo de cocobacilos, siendo las especies más importantes de este grupo Oligella urethralis y Oligella ureolytica, que se han encontrado produciendo infecciones urinarias. Eikenella spp. son también flora normal gingival e intestinal. La especie más importante es Eikenella corrodens, un bacilo Gram negativo oxidada positivo, se ha encontrado produciendo infecciones locales por mordeduras humanas. 

 La especie Chryseobacterium (Flavobacterium) meningosepticum es una bacteria no móvil, oxidasa positiva que produce un pigmento amarillo. Es un agente causante de meningitis y sepsis neonatal, aunque es muy raro encontrar esta especie en infecciones de adultos. Esta especie coloniza vías respiratorias, por lo que es frecuente encontrarlo en aislamientos de muestras clínicas humanas. 

Las especies de Alcaligenes son bacilos móviles por flagelos peritricos que están bioquímica y filogenéticamente muy relacionados con Bordetella. Al cultivarlas, las colonias presentan olor a frutas y produce un color verdoso en el agar sangre. Se encuentran frecuentemente contaminando nebulizadores y respiradores.

Las especies más importantes en muestras clínicas son A. faecalis, A. piechaudii, A. xylosoxidans subsp. denitrificans y A. xylsoxidans subsp. xylosoxidans. Otros grupos menos frecuentes incluyen Actinobacillus actinomycetemcomitans, un cocobacilo involucrado en enfermedad periodontal y Capnocytophaga, bacilos fusiformes filamentosos de la flora normal de boca, aunque C. gingivalis produce enfermedad periodontal en humanos y C. canimorsis es flora normal de perros por lo que se encuentra produciendo infecciones en heridas por mordeduras de perros. Adicionalmente se incluyen en este heterogéneo grupo de bacterias a Cardiobacterium hominis, un bacilo pleomórfico causante de endocarditis que crecen lentamente en agar sangre, por lo que se debe incubar el medio por dos o tres semanas. Chromobacterium violaceum es una bacteria muy similar a Pseudomonas pero se diferencia por producir un pigmento violeta. 

Esta especie produce abscesos y diarrea y las infecciones con esta bacteria, aunque infrecuentes, tienen una alta tasa de mortalidad. 2. Clasificación de los diferentes géneros y especies de bacilos Gram negativos, no fermentadores, distintos a Pseudomonas y Burkholderia. 

 A continuación se brindan una serie de cuadros que pueden ser utilizados como una guía para la identificación de bacilos Gram negativos, no fermentadores, diferentes a Pseudomonas y Burkholderia. Nótese que se utilizan las mismas pruebas bioquímicas para la identificación de este grupo-. 

El cuadro 1 puede ser utilizado para la orientación inicial en la identificación. Mientras que los cuadros 2-7 se utilizan en la identificación final a nivel de especie.

Cuadro 1. Esquema para la identificación de bacilos Gram-negativos no fermentadores diferentes a Pseudomonas y Burkholderia.

   

Cuadro 2. Bacilos Gram-negativos, no fermentadores, oxidasa negativa, indol negativo.

Cuadro 3. Características fenotípicas de especies de Acinetobacter

Cuadro 4. Cocobacilos Gram-negativos, asacarolíticos, oxidasa-positivos, indol negativos

 

Cuadro 5. Bacilos Gram-negativos, no cocoides, asacarolíticos, oxidasa positivos, indol negativos

Cuadro 6. Bacilos Gram-negativos, no cocoides, sacarolíticos, no fermentadores, oxidasa positivos, indol negativos

Cuadro 7. Bacilos Gram-negativos, no fermentadores, oxidasa positiva, indol positivo, no móviles