Bordetella bronchiseptica

 

Dentro del grupo de bacterias conocidos como bacilos no fermentadores o NFBs, que presentan forma bacilar, son Gram negativos y no tienen la capacidad de fermentar la glucosa, sobresale por su importancia la Clase Beta protobacteria del Orden Burkholderiales la Familia Alcaligenaceae con sus géneros Alcaligenes, Achromobacter y Bordetella.

El género Bordetella contiene 8 especies: B. pertussis, B. avium, B. bronchiseptica, B. hinzii, B. holmesii, B. parapertussis. B. petrii y B.trematum.

Las bacterias de este género son bacilos pequeños Gram negativos que miden aproximadamente 0.2 a 0.3 micras de ancho por 0.5 a una micra de largo. Se observan como cocobacilos únicos o en pares y rara vez en cadenas. Estas bacterias crecen en el medio de Bordet-Gengou el cual es una gelosa sangre con papa glicerolada. Las colonias en este medio son lisas, convexas, de apariencia perlada y brillante casi transparentes y rodeadas de una zona de hemólisis no definida.

No licuan la gelatina, La leche tornasolada la viran a la alcalinidad y no requieren factores X ni V. La temperatura óptima de crecimiento es 35-37°C. Presentan antígenos lábiles al calor tanto a nivel de género como de especie. Son parásitos de mamíferos y patógenos a nivel del aparato respiratorio; las cepas de Bordetella pertussis causan la tosferina.

Bordetella pertussis es considerada un patógeno exclusivo de los humanos. La bacteria se disemina mediante los aerosoles o el contacto directo. En los primeros estadios de la enfermedad los síntomas se parecen a los de un resfriado común. En el segundo estadio se desarrolla una tos no productiva y seca. Los episodios de tos pueden llegar a ser paroxismales y van acompañados de un silbido respiratorio al final de ellos. También puede encontrarse exceso de mucosidad, náuseas e inclusive vómito. Este tipo de tos es característico de la enfermedad y puede ser tan severa que cause cianosis y convulsiones.

Bordetella parapertussis es muy semejante a la especie anterior. Sin embargo, es oxidasa negativa y presenta en medios con peptona como la gelosa BHI y en agar Mueller Hinton un pigmento café soluble en agua. También puede crecer en agar MacConkey.

Bordetella bronchiseptica se encuentra frecuentemente como biota normal de las vías respiratorias de conejos, perros y otros animales. Sin embargo, en algunas ocasiones les puede producir una enfermedad respiratoria. Las infecciones humanas por este microorganismo son raras. Crece más rápidamente que las especies anteriores y forma colonias más grandes, las cuales son de color blanco grisáceo y superficie rugosa en el medio de Bordet-Gengou.

Bordetella bronchiseptica es un cocobacilo Gram negativo, aerobio estricto y móvil. Su identificación microbiológica estándar se basa en un perfil característico de pruebas bioquímicas: es oxidasa, catalasa y ureasa positivo, motil (a diferencia de otras especies del género), y bioquímicamente asacarolítico (no fermenta azúcares)

1. Pruebas Enzimáticas y Metabólicas Principales

• Oxidasa: Positiva (\(+\)).

• Catalasa: Positiva (\(+\)).

• Ureasa: Positiva (\(+\)) rápida (generalmente en menos de 4 horas).

• Motilidad: Positiva (\(+\)).

• Reducción de Nitratos: Variable (positiva en la mayoría de las cepas)

2. Pruebas de Utilización de Carbohidratos (No Fermentadora)
A diferencia de otras bacterias, no produce ácidos ni gases a partir de azúcares: 

• Glucosa (Oxidación-Fermentación - OF): Negativa (\(-\)).

• Lactosa, Manosa, Sacarosa, Maltosa: Negativa (\(-\)).

3. Otras Pruebas Bioquímicas Relevantes

• Citrato (Simmons): Positivo (\(+\)).

• Producción de Indol: Negativa (\(-\)).

• Producción de \(H_{2}S\) (Ácido Sulfhídrico): Negativa (\(-\)).

• Descarboxilación de Aminoácidos (Lisina, Ornitina y Arginina): Negativas (\(-\)).

4. Uso de Sistemas Automatizados (API 20E y VITEK 2)
Debido a que el cultivo bacteriológico en medios enriquecidos (como Bordet-Gengou o agar sangre) puede tomar entre 24 y 48 horas, los laboratorios suelen agilizar la identificación utilizando tiras miniaturizadas comerciales o sistemas automatizados.

• En el sistema API 20E, Bordetella bronchiseptica típicamente arroja resultados negativos para la mayoría de las pruebas de azúcares y enzimas del panel, pero destaca fuertemente en la prueba de la ureasa y la oxidasa.

• En equipos como VITEK 2, se utiliza la tarjeta específica para bacilos Gram negativos no fermentadores (GN), donde su perfil asacarolítico y positivo a la ureasa y oxidasa permite identificar la bacteria de manera inequívoca.

Debido a la naturaleza inerte de la bacteria en pruebas de fermentación de azúcares, se diferencia rápidamente de otras bacterias Gram negativas similares (como el género Alcaligenes) o de otras Bordetellas (como Bordetella pertussis, que es ureasa negativa y no móvil). 

Bordetella bronchiseptica en agar Sangre, 48 hrs

Bordetella bronchiseptica en agar Mc Conkey, 48 hrs

Bordetella bronchiseptica en agar Müeller Hinton, 48 hrs

SABORES DELICIOSOS

SABORES DELICIOSOS: VISITA MI CANAL :)

CREATININA

 

1. En la determinación de creatinina ¿Qué pasa en el primer minuto después de que se agrega la muestra al reactivo? Antes de realizar la lectura de la absorbancia 1.

La lectura inicial se toma realmente cuando casi no ha ocurrido formación de color. De esta manera, cualquier absorbancia a este tiempo es principalmente ocasionada por interferentes espectrales endógenos. El principal inconveniente de este método es la falta de especificidad, con interferencias tanto positivas (ascorbato, proteínas, piruvato) como negativas (acetato, hemoglobina, N-acetilcisteína) que condicionan un error de medición que es mayor en las muestras con concentraciones inferiores a 177 μmol/L.

Los ensayos cinéticos fueron desarrollados para mejorar el análisis, porque algunos de los cromógenos interferentes se forman rápidamente durante los primeros 20 segundos (s), periodo en el que entran en contacto el reactivo y la muestra (como en el caso del acetoacetato); otros reaccionan lentamente, a los 80-100 s de haber mezclado la muestra y el reactivo (como es el caso de las proteínas).

Por lo tanto la señal obtenida entre los 20 y 60 s o 20 y 80 s es atribuída predominantemente a la reacción entre la creatinina y el picrato.

2.  En la determinación de urea por el método enzimático ureasa-GLDH ¿qué pasa en el primer minuto después de que se agrega la muestra al reactivo? Antes de realizar la lectura de la absorbancia 1.

Como en el caso anterior  los ensayos cinéticos mejoran el análisis, dado que algunos de los cromógenos interferentes se forman rápidamente durante los primeros 20 segundos (s), periodo en el que entran en contacto el reactivo y la muestra; otros reaccionan lentamente después de haber mezclado la muestra y el reactivo. Algunos interferentes son la hemoglobina, niveles elevados de amonio y medicamentos.

Por lo tanto la señal obtenida entre los 20 y los 60 segundos es atribuída predominantemente a la oxidación de NADH a NAD+ ocasionando una disminución en la absorbancia que es proporcional a la cantidad de urea en la muestra.

3. Diseñar tablas donde se indiquen las alteraciones macroscópicas de la orina (olor, color, turbidez, volumen –una tabla para cada alteración), para lo cual deben consultar al menos tres referencias diferentes (únicamente libros, no artículos ni páginas web)

Tabla 1. Coloración de las orinas.

Color	Patologías/sustancias presentes
Incoloro	Normal, consumo reciente de líquidos.
Amarillo pálido	Poliuria o diabetes insípida
Amarillo intenso	Riboflavina, muestra concentrada, normal después de una actividad física extenuante
Ambar	Deshidratación por fiebres y quemaduras.
Anaranjado	Acriflavina, Bilirrubina, santonina, pyridium
Rosada	Presencia de eritrocitos, hemoglobina, mioglobina, Rifampicina,  ingesta de medicamentos o remolacha
Roja	Presencia de hemoglobina libre, mioglobina y porfirinas, así como la ingesta de fármacos como la rifampicina, hemorragia glomerular  y contaminación con menstruacion
Marrón	Eritrocitos oxidados a metahemoglobina, presencia de bilirrubina, hematina, nitrofurantoína, metabolopatía congénita.
Verde	Bilirrubina oxidada, infección por Pseudomonas e infección intestinal.
Negro	alcaptonuria, presencia de metahemoglobina, melanina, ácido homogentísico, Metronidazol,  metabolopatía congénita..

Tabla 2. Causas comúnes del olor en las orinas

Olor	Patologías/sustancias presentes
Suave	Normal
Fétido similar al amoníaco	Descomposición bacteriana, infección bacteriana
Frutal, dulce	Cetonas (diabetes mellitus, inanición y vómitos)
Jarabe de arce	Aumento de leucina, isoleucina y valina. Enfermedad de la orina en jarabe de arce
“A ratón”	Fenilcetonuria
Rancio	Tirosinemia
“Pies sudorosos”	Acidemia isovalérica
“A col”	Malabsorción de metionina
Lejía	Contaminación

 

Tabla 3. Aspecto de la orina

Aspecto	características/patologías/sustancias presentes	Causas patológicas de la turbidez	Causas no patológicas de la turbidez
Límpida	No se observan partículas es transparente.	Leucocitos Eritrocitos Levaduras Bacterias Células epiteliales no escamosas Cristales anormales Linfa Lípidos	Células epiteliales escamosas Moco Fosfatos amorfos, carbonatos, uratos Semen  Espermatozoides Contaminación fecal
Brumosa	Presencia de pocas partículas
Nebulosa	Presencia de muchas partículas
Turbia	Presencia de muchas partículas, no se puede ver a través de la muestra
Lechosa	Puede precipitar y formar coágulos

Tabla 3.1 Correlaciones de laboratorio en la turbidez de la orina

Tipo de muestra	Se observan
Orina ácida	Uratos amorfos
Orina alcalina	Fosfatos amorfos y carbonatos
Soluble con calor	Cristales de uratos amorfos y ácido úrico.
Soluble en ácido acético diluido	Eritrocitos, fosfatos amorfos, carbonatos
Insoluble en ácido acético diluido	Leucocitos, bacterias, levaduras, espermatozoides.
Soluble en éter	Lípidos, Linfa, quilo

Tabla 4. Alteraciones del volumen urinario

Nombre	Características	Patologías
Poliuria	Eliminación de más de 2 L/24 h	Diabetes mellitus o en la diabetes insípida, en la glomerulonefritis crónica, en la pielonefritis, y otras enfermedades
Oliguria	Emisión de 400 ml o menos	Nefrosis o en la glomerulonefritis aguda
Anuria	Emisión menor a 100 ml/24 h	Obstrucción de las vías urinarias o a una severa glomerulonefritis
Nicturia	emisión de orina durante la noche	Disminución: reducción fisiológica de la filtración renal Aumento: cardiopatías, hipertensión o otras enfermedades renales

4. En una tabla, relacionar los resultados de la tira de orina con los resultados que se puedan observar en el examen microscópico (por ejemplo, si tengo pH 6.5 entonces en el examen microscópico observaremos cristales de pH ácido, de manera que en la tabla en una columna colocaré pH 6.5 y en la otra columna los cristales relacionados con este pH)

pH ácido	ph alcalino
Acido hipurico	carbonato de calcio
ácido úrico	fosfato amorfo de calcio
bilirrubina	fosfato triple
cistina	biurato de amonio
colesterol
leucina
oxalato de calcio
Sulfato de calcio
sulfonamidas
tirosina
urato amorfo
urato de sodio

Referencias  Bibliográficas:

1. Determinación de urea, Método enzimático [en línea] Consultado el 30/03/16. Disponible en: http://www.linear.es/ficheros/archivos/1156010C.pdf

2. Strasinger, Di Lorenzo (2008) “análisis de orinas y líquidos corporales”  5ª edición, Buenos Aires, Ed. médica panamericana S.A [en línea] Consultado el 31/03/16. Disponible en: https://books.google.com.mx/books?id=uJmKmviIUdoC&pg=PA41&dq=examen+fisico+de+la+orina&hl=es-419&sa=X&ved=0ahUKEwij66aQmOvLAhWCloMKHTTvALoQ6AEIJDAA#v=onepage&q=examen%20fisico%20de%20la%20orina&f=false

3. Graff Laurine, Sister; (2007) “Análisis de orina: atlas color” 2 edición, Editorial medica panamericana: México.